HPLC (高速液体クロマトグラフィー) 実務講座

高速液体クロマトグラフィー (HPLC) を日常分析で使いこなせるようになるには、装置の操作に熟練することに加えて、HPLCに関する基礎的な知識や手順書や試験法などに書かれていない実践的な知識をしっかり習得しておくことが肝要です。 　本セミナーでは、HPLCを上手く使えるようになるために知っておきたい基礎知識から、HPLC分析の現場で必須となる実践ノウハウ、いざという時に慌てないためのよくあるトラブルと対処法まで、わかりやすく解説します。

1. 第1部:知っておきたいHPLCの基礎知識
   • HPLCを理解する上で必要な基礎知識として、基本原理、各種用語、基本パラメーター、装置各部について解説します。
   1. HPLCの原理と各種パラメーター
      • クロマトグラフィーとは、分離の仕組み
      • クロマトグラムの読み方、基本パラメーターの定義と意味
   2. HPLCにおける分離モード
      • 極性の基本的な考え方
      • 移動相の溶出力と溶媒強度
      • 吸着、分配 (順相・逆相) 、イオン交換、サイズ排除の原理
   3. HPLC装置の基礎
      • 送液部
        • 送液ポンプ
        • グラジエント溶離
        • 脱気装置
      • 試料導入部
        • オートサンプラー
        • マニュアルインジェクター
      • 分離部
        • カラム
        • 充塡剤
        • カラムオーブン
      • 検出部
        • 吸光光度検出器
        • 蛍光検出器
        • 示差屈折率検出器など
2. 第2部:現場で必要な実践ノウハウ
   • HPLCを実際に分析の現場で使う際、知っておくべきノウハウについて、分析の手順に沿って解説します。
   1. 移動相に関するノウハウ
      • 水、有機溶媒、緩衝液の選び方と留意点
      • 移動相の調製方法と脱気
   2. 試料調製と注入に関するノウハウ
      • 試料溶媒の選び方と留意点
      • 試料前処理の基本
   3. 分離に関するノウハウ
      • 逆相における分離の最適化
        • カラム
        • 移動相
        • 温度
      • グラジエント溶離の留意点
   4. 検出に関するノウハウ
      • 検出器の選び方と留意点
      • 誘導体化検出法
3. 第3部:よくあるトラブルとその対処法
   • 日常的にHPLC分析を行っているとしばしば遭遇するトラブルについて、症状別に考えられる原因とその対処法を解説します。
   1. 負荷圧の上昇
   2. ノイズの増大とドリフト
   3. 保持時間の変動
   4. ピーク面積の変動
   5. 不明ピークの出現
   6. ピーク形状の異常