分取HPLCの基礎・クロマトグラムの解析法と分析上の留意点

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本セミナーでは、HPLCの基礎から解説し、乱れたピークの判別、ピークが乱れる要因と対処法等、熟練者のデータ解釈の考え方、経験に裏打ちされた分析条件設定のコツを解説いたします。

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プログラム

分析用HPLCと分取HPLCの基本的な違いを説明し、今後の分取HPLCの活用を明示する。分取HPLCの基礎と解析法と試料前処理法び日常保守について解説し、その後、装置のトラブルシューティングついても詳しく説明する。業務中に装置が正常ではなくなった時にはどのように対処してゆけばよいのかを具体的に解説する。  日々の業務で分取HPLCをうまく使いこなせるには、どのような技術が必要かを念頭に置いて解説して行く (2例のビデオ解説を盛り込む)  この講座を契機に実験者が安心して分取HPLCを使いこなせるようになる事を目指すセミナーである。

  1. 第1部 分取HPLCの基礎及びクロマトグラム解析法と試料前処理の方法
    1. 装置の概要と流路フロー図と基本的なメンテナンス
      • HPLCポンプ
      • 検出器
      • オートサンプラー
      • レコーダー
      • グラジエントミキサー
      • フラクションコレクター 全流路の理解
    2. クロマトグラフィーの分離カニズムの理解
      • 吸着クロマトグラフィーの解説
      • 分配クロマトグラフィーの解説
      • アフィニテイークロマトグラフィーの解説
      • イオン交換クロマトグラフィーの解説
      • ゲル濾過クロマトグラフィーの解説
    3. 分取カラム種類とカラム選定技法
      • 吸着用カラム
      • 分配用カラム
      • イオン交換用カラム
      • ゲル濾過用カラム
      • アフィニテイ用カラム
    4. 試料前処理技術と溶離液作成法
      • 原材料からの有効成分の抽出法 (特異な方法についても解説)
      • 不純物、微細物の除去技術 (必要装置)
      • 溶離液の作成法、濃度の計算法 (モル、%、PPM等) (溶解度、比重等)
        • 純水の製造法
        • 緩衝液の作成法
        • pH調整液の作成法
        • 溶離液の保存法
      • ビデオによる解説 1~2例 (10分程度) 予定
    5. 分取カラムの寸法の決め方
      • 最初は分析から始める
      • 分離度Rsをもとににカラム選択
      • カラムスケールアップの計算法
      • 分取クロのより効率化の検討法
        • 経費
        • 時間
        • イニシャルコスト 等
  2. 第2部 日常保守点検と分取装置のトラブルシューティング
    1. 日常保守点検
      1. HPLCポンプ内洗浄のコツ
      2. マイクロシリンジの詰り
      3. オートサンプラーの詰り
      4. 注入口から排出口までの流路の詰りと洗浄
      5. ラインフィルターの詰り
      6. プレカラムのつけ方と洗浄法
      7. 試料の採取法と保存方法
      8. 溶離液の腐敗防止
      9. フラクションコレクターの整備
      10. 使用後のカラムの洗浄と保管法
      11. 分取溶液の保管方法
        • ビデオによる解説 1~2例 (10分程度) 予定
    2. トラブルシューティング
      1. 駆動ポンプのトラブル
      2. 溶離液の脱酸素装置のトラブル
      3. ラインフィルターのトラブル
      4. オートインジェクターのトラブル
      5. 汎用される検出器のトラブル
      6. 各種検出器のトラブル
      7. カラム恒温層のトラブル

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