HPLCの基礎・クロマトグラムの判断とトラブル対策

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本セミナーでは、HPLCの基礎から解説し、乱れたピークの判別、ピークが乱れる要因と対処法等、熟練者のデータ解釈の考え方、経験に裏打ちされた分析条件設定のコツを解説いたします。

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プログラム

本講座は最初に液体クロマトグラフィーの基本的な構成を説明すると共にクロマトグラフィーの分離のメカニズムについても解説する。その後、クロマトグラムの判断と装置のメンテナンスの仕方、本体装置とカラムに関するトラブル対策を中心に講義をする。これらのクロマトグラフィーに関する知識が日々の実験に役立つことを目的として講義を進める。

  1. HPLCの基礎
    1. 装置の概要と流路フロー図とメンテナンス
      • ポンプ
      • 検出器
      • オートサンプラー
      • レコーダー
      • グラジエントミキサー
      • フラクションコレクター
    2. 分離メカニズム
      • 吸着クロマトグラフィーに関して
      • 分配クロマトグラフィーに関して
      • アフィニテイークロマトグラフィーに関して
      • イオン交換クロマトグラフィーに関して
      • ゲル濾過クロマトグラフィーに関して
    3. カラム種類とカラム選定技法
      • 吸着用カラム
      • 分配用カラム
      • アフィニテイー用カラム
      • イオン交換用カラム
      • ゲル濾過用カラム
    4. 試料前処理技術と溶離液作成法
      • 不純物、微細物の除去技術
      • 溶離液の作成法
        • 純水の製造法
        • 緩衝液の作成法
        • pH調整液の作成法
        • 溶離液の保存法
    5. クロマトグラムの基本的な読み方
  2. クロマトグラムの乱れ現象に関して
    1. 乱れたピークの要因と解決法
      • 重複したピーク
      • テーリングピーク
      • リーディングピーク
      • ブロードに関して
    2. 崩れたクロマトグラムの解釈 (ピーク形状の悪化を招く分析法の問題点)
    3. 定量計算とクロマトグラム処理法
    4. 正しい値を出すクロマトグラムの設定)
  3. トラブル解決法
    1. 駆動ポンプ
    2. 脱酸素装置
    3. ラインフィルター
    4. インジェクションのトラブル
    5. 汎用される検出器のトラブル
    6. 特殊な検出器のトラブル
    7. カラム恒温層

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