細胞培養の基礎と品質管理/トラブル対策 入門講座

細胞を取り扱う上での基礎的な知識 (細胞を増やす、保存する等) 、細胞バンクでの品質管理 (汚染、細胞の取り違え、各種検査) 等を紹介いたします。

1. 細胞培養の基礎知識
   1. 細胞を培養する環境・無菌操作
      • 細胞培養に適した環境
      • 細胞培養に必要な機器、管理
      • 無菌操作・火炎滅菌
      • 作業しやすいレイアウト
   2. 培養細胞とは
   3. 培地、血清の選択
      • 培地の選択
      • 抗生物質
      • 増殖因子
      • 血清
      • 血清のロットチェック
   4. 細胞培養における各操作上の注意点
      • 細胞を観察する
      • 細胞を継代する
      • 細胞を凍結する
      • 細胞を融解する
      • 細胞増殖曲線の作成法
   5. 細胞の増殖が変化する要因
2. 細胞の品質管理
   1. 細胞の保存
      • 凍結・融解時の注意点
      • 長期保存による細胞生存率の変化
      • 長期保存する場合の注意
   2. 微生物汚染
      • 汚染の確認
      • 汚染の原因、予防
   3. マイコプラズマ汚染
      • マイコプラズマについて
      • マイコプラズマ検査 (DNA染色法)
      • マイコプラズマ検査 (PCR法)
      • マイコプラズマ検査 (マイコアラート法)
   4. 細胞の種の同定
      • 動物種検査
        • 動物種検査 (PCR法)
        • DNAバーコーディング法
      • マウス系統検査 (SSLP法)
      • ヒト由来 (個人同定法) 検査 (STR-PCR法)
   5. 細胞同定検査の事例
      • マウス細胞 事例1 (系統が異なる)
      • マウス細胞 事例2 (同じ細胞名でも性質が異なる)
      • ヒト細胞 事例1 (同一人由来細胞でも性質が異なる)
      • ヒト細胞 事例2 (同じ細胞名でも性質が異なる)
   6. クロスコンタミネーションをおこさないためには
      • クロスコンタミネーションの原因
      • クロスコンタミネーションの予防
3. 品質管理された細胞の入手
   1. 細胞バンクとは
      • 細胞バンクの概要
      • 細胞バンクで行われている培養検査・品質管理法
   2. 細胞を入手したら
      • 細胞の入手・履歴
      • 細胞培養の記録
   3. 論文発表をするときには
      • 細胞の入手先の記載
      • 細胞バンクからの検査書