メチル化DNAの測定技術開発

第1部. がん診断のための血中メチル化DNAの簡易検出法の開発

(2017年2月6日 10:30〜11:30)

　DNAメチル化は、DNA上で最も頻繁に起こる化学修飾であり、遺伝子発現を制御する鍵反応である。その質と量が異常になった時、細胞機能が乱れ疾病を引き起こす。そのもっとも典型的な例が細胞のがん化である。 　本セミナーでは、化学的にDNAメチル化を解析する技術を振り返り、それらの特徴と問題点を議論する。また、最新のメチル化DNA解析法とその使い方についても紹介する。

1. DNAメチル化とは
2. DNAメチル化解析法の実際
3. DNAメチル化解析の新技術

第2部. メチル化DNA簡易測定法の開発

(2017年2月6日 11:45〜13:15)

　ヒトゲノムDNAにおいてシトシン・グアニン配列中のシトシンはメチル化され、これが遺伝子発現制御に関連している。 　正常細胞と比較すると、がん細胞では癌関連遺伝子のメチル化状態が異常になること、またゲノム全体のメチル化頻度が低下していることが報告されており、これらは癌のバイオマーカーとして期待されている。 　本セミナーでは遺伝子特異的なメチル化頻度とゲノム全体のメチル化頻度を簡便に測定する方法について紹介する。

1. DNAメチル化
2. 遺伝子特異的メチル化頻度測定方法
   1. バイサルファイト処理を利用する方法
   2. メチルシトシン認識分子を利用する方法
   3. DNA四重鎖構造を利用する方法
3. ゲノム全体のメチル化頻度測定方法
   1. HPLCを利用する方法
   2. バイサルファイト処理を利用する方法
   3. メチルシトシン認識分子を利用する方法
4. まとめ
• 質疑応答

第3部. 臨床的に活用されているDNAメチル化診断

(2017年2月6日 14:00〜15:30)

　がんの臨床病理学的諸性状に関連する多くの遺伝子の異常メチル化が報告されている。 　さらに、異常メチル化を指標とすることで、がんのリスク、患者の予後および治療効果を予測できる可能性が高まっている。 　特にMGMT遺伝子メチル化は脳腫瘍における抗がん剤治療の効果を予測する代表的因子として活用されており、DNAメチル化はがん診断のバイオマーカーとして実用化が進んでいる。 　本セミナーでは、臨床的に活用されているDNAメチル化診断に着目し、その作用機序およびがん診断への効果について紹介する。

1. がんの臨床病理学的諸性状に関わるDNAメチル化の概要
2. 治療予測因子としてのDNAメチル化の実用化
   1. 抗癌剤の薬剤耐性におけるMGMT酵素の分子機構
   2. MGMT遺伝子メチル化に基づく脳腫瘍の化学療法の評価と現状
3. がん診断へのDNAメチル化解析の応用
   1. 前立腺がん診断へのメチル化バイオマーカー
   2. がんのリスク予測マーカー
4. 将来的に期待されるメチル化バイオマーカーと診断法の開発
5. まとめ
• 質疑応答

第4部. 胃癌におけるDNA異常メチル化の分子誘導機構

(2017年2月6日 15:45〜17:15)

　遺伝子プロモーター領域のDNA異常メチル化による遺伝子サイレンシングは多くの悪性腫瘍において癌抑制遺伝子を不活化する重要な分子機構である。 　その中でも胃癌はDNA異常メチル化の関与が大きく、Epstein – Barrウイルス関連胃癌は全てのヒト悪性腫瘍の中でも最も顕著なDNA異常メチル化を呈するサブタイプである。 　本セミナーでは、メチル化DNA検出・測定・診断への応用を理解する上で重要な、癌にどのように異常メチル化が誘導されるか、その機構について胃癌を例に挙げて解説する。

1. 胃癌の層別化と各サブタイプのゲノム網羅的DNAメチル化模様
2. 各メチル化サブタイプの原因
   1. ピロリ菌感染・慢性炎症による異常メチル化蓄積
   2. Epstein – Barrウイルス感染による異常メチル化誘導
3. 異常メチル化の分子機構
   1. メチル化誘導因子とメチル化抵抗因子
   2. メチル化抵抗因子の低下による異常メチル化獲得
• 質疑応答